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ELISA試劑盒操作指南:確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的步驟詳解與注意事項(xiàng)
2024-09-10產(chǎn)品中心/ products
紅細(xì)胞生成素(EPO)大鼠ELISA試劑盒Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。
聯(lián)系電話(huà):0755-28019324
品牌 | 其他品牌 | 貨號(hào) | RQ-FS1701A |
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規(guī)格 | 96T/48T | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 科研試驗(yàn) | 品牌 | 瑞清 |
運(yùn)輸 | 順豐包郵 | 檢測(cè)種屬 | 人,小鼠,大鼠,植物,魚(yú),蝦,蟹,牛,羊,狗,貓,微生物,細(xì)胞,土壤等動(dòng)植物 |
售后 | 專(zhuān)屬服務(wù) | 可售地 | 全國(guó) |
大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒
ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲(chóng)病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來(lái)測(cè)定抗ti,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大。
免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書(shū)操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
3. 產(chǎn)品特點(diǎn)
一、紅細(xì)胞生成素(EPO)大鼠ELISA試劑盒高效、靈敏、特異的抗ti;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型;
五、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過(guò)程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說(shuō)你的回收率是99%,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,說(shuō)明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無(wú)機(jī)氯含量測(cè)定,樣品水中含有無(wú)機(jī)氯20mg/L,取100mL被測(cè)水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無(wú)機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測(cè)定時(shí)忽略體積變化,如果測(cè)定出樣品中無(wú)機(jī)氯為29.8mg/L,則認(rèn)為回收率為99%。
紅細(xì)胞生成素(EPO)大鼠ELISA試劑盒組成結(jié)構(gòu):
1、血清:操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)du素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、血漿:EDTA、檸檬suan鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑盒成分
1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T
2 酶標(biāo)記抗ti: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1
3 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2
4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5 標(biāo)記抗ti稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7 終止液: 1N硫suan 12mL x 1
8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說(shuō)明 1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒(méi)有提供) 酶標(biāo)儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗ti和顯色劑)
常用方法及原理如下:
1. 夾心法:
夾心法常用于檢測(cè)大分子抗原,一般的操作步驟為:
a. 將具有專(zhuān)一性的抗ti固著(coating)于塑膠孔盤(pán)上,完成后洗去多余抗ti
b. 加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)的抗原,則其會(huì)與塑膠孔盤(pán)上的抗ti進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié)
c. 洗去多余待測(cè)檢體,加入另一種對(duì)抗原專(zhuān)一的一次抗ti,與待測(cè)抗原進(jìn)行鍵結(jié)
d. 洗去多余未鍵結(jié)一次抗ti,加入帶有酶的二次抗ti,與一次抗ti鍵結(jié)
e. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗ti,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果
原理:針對(duì)抗原分子上2個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗ti分別作為固相抗ti和酶標(biāo)抗ti,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物。
2. 間接法
間接法常用于檢測(cè)抗ti,一般的操作步驟為:
a. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤(pán)上,完成后洗去多余的抗原。
b. 加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)的一次抗ti,則其會(huì)與塑膠孔盤(pán)上的抗原進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié)。
c. 洗去多余待測(cè)檢體,加入帶有酶的二次抗ti,與待測(cè)的一次抗ti鍵結(jié)。
d. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗ti,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISA reader)測(cè)定塑膠盤(pán)中的吸光值(OD值),以評(píng)估有色終產(chǎn)物的含量即可測(cè)量待測(cè)抗ti的含量。
原理:利用酶標(biāo)記的抗抗ti以檢測(cè)已與固相結(jié)合的受檢抗ti。
3. 競(jìng)爭(zhēng)法
競(jìng)爭(zhēng)法是一種較少用到的ELISA檢測(cè)機(jī)制,一般用于檢測(cè)小分子抗原,其操作步驟為:
a. 將具有專(zhuān)一性的抗ti固著于塑膠孔盤(pán)上,完成后洗去多余抗ti
b. 加入待測(cè)檢體,使檢體中的待測(cè)抗原與塑膠孔盤(pán)上的抗ti進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié)
c. 加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤(pán)上的抗ti進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結(jié),由于塑膠孔盤(pán)上固著的抗ti數(shù)量有限,因此當(dāng)檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗ti就越少,亦即,兩種抗原皆競(jìng)相與塑膠孔盤(pán)上抗ti鍵結(jié),即所謂競(jìng)爭(zhēng)法之由來(lái)。
d. 洗去檢體與帶有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,當(dāng)檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤(pán)內(nèi)留下之帶有酶的抗原越少,顯色也就越淺。
e. 當(dāng)需要偵測(cè)無(wú)法獲得兩種以上單一性抗ti的抗原,或是不易得到足夠的純化抗ti以固著于孔盤(pán)上時(shí),一般會(huì)考慮使用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA。
常見(jiàn)問(wèn)題解析:
1、試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍。
2、加樣中可能遇到的問(wèn)題。
3、洗板時(shí)容易造成誤差。
4、顯色問(wèn)題:使用了過(guò)期的顯色劑或者是顯色劑用過(guò)后放置時(shí)間太長(zhǎng),都有可能造成顯色劑不顯色。
5、終止反應(yīng):在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快,產(chǎn)生氣泡,造成假陽(yáng)性結(jié)果,所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒。
6、讀板:讀板的時(shí)候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈。
訂購(gòu)說(shuō)明:
※關(guān)于產(chǎn)品售價(jià),由于市場(chǎng)的不穩(wěn)定性,價(jià)格變動(dòng)是必然的,但是我們可以提供當(dāng)下公允的市場(chǎng)價(jià)格,批量訂購(gòu)還可享受相應(yīng)的優(yōu)惠活動(dòng);
※關(guān)于產(chǎn)品的具體信息,本頁(yè)面展示的內(nèi)容僅供參考,而詳細(xì)的產(chǎn)品信息,可以咨詢(xún)我們;
※關(guān)于運(yùn)費(fèi)問(wèn)題,批量訂購(gòu)可免郵,本品采用低溫箱冷凍保存;
※關(guān)于服務(wù),我們提供完整的售前售后服務(wù),并貫穿你的整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程,如遇技術(shù)問(wèn)題,可隨時(shí)聯(lián)系我們,我們真誠(chéng)地為您答疑解惑。
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